【摘要】目的：探讨昼夜节律关键基因BMAL1在小鼠骨折愈合过程中的作用。方法：构建40只BMAL1基因敲除（KO）与野生型（WT） 小鼠股骨骨折模型，采用髓内钉固定，并在术后第7、14、21、28天取材。通过Micro CT三维重建，定量分析骨体积分数（BV/TV）、 骨小梁厚度（Tb.Th）、骨小梁数目（Tb.N）、骨小梁间距（Tb.Sp）以及组织矿物密度（TMD），观察骨痂形成及骨结构变化。结合苏 木精-伊红染色法与甲苯胺蓝染色，评估组织学水平的骨修复及软骨转化情况；并通过免疫荧光染色检测关键成骨与成软骨相关蛋白[骨 桥蛋白（BSP）、Ⅱ型胶原（COL-Ⅱ）及抗聚集蛋白多糖（ACAN）]的表达差异。结果：BMAL1缺失显著延缓新骨形成。Micro-CT结 果显示，KO组骨痂形成薄弱，在骨折愈合的第21天较WT组显示出软骨分化异常或不完全成熟；KO组的BV/TV、Tb.Th、Tb.N均低 于WT组，Tb.Sp显著升高（P＜0.05）。组织学结果表明，WT组在术后第14天已出现结构清晰的骨小梁及成熟软骨；而KO组仍以 纤维组织为主，伴随炎症延长及软骨形成不足。第28天，WT组的骨痂基本完成骨化，KO组仍存在大量未骨化软骨。免疫荧光结果显示， BMAL1的缺失显著降低BSP、COL-Ⅱ及ACAN的表达水平。结论：BMAL1缺失会显著延缓骨折愈合，表现为骨痂形成不足、软骨转化 受阻及成骨与成软骨相关蛋白表达下降。 

【关键词】BMAL1；昼夜节律；骨折愈合；软骨内成骨；荧光图像